尚来助
每年都有不一定比例的猪场因猪流行性腹泻（Porcine Epidemic Diarrhea, PED）而造成严重的损失，下面就猪流行性腹泻有关特点、发病机理病理、流行规律等方面进行简单实用的小结。
一、病原
猪流行性腹泻病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus, PEDV），属于冠状病毒科冠状病毒属。
二、流行病学
本病只发生于猪，各种年龄的猪都能感染发病。近年来后备母猪、哺乳猪发病率很高，尤其以哺乳猪受害最为严重，母猪发病率变动很大。病毒存在于肠绒毛上皮细胞和肠系膜淋巴结，随粪便排出后，污染环境、饲料、饮水、交通工具及用具等而传染。
三、主要感染途径是消化道
如果一个猪场持续发病，病毒会不断感染失去母源抗体的断奶仔猪，使本病反复发生，一般第一次发生后隔一段时间或几个月后会发生第二次，控制不当甚至第三次。
四、发病机理
病毒经口和鼻感染后，直接进入小肠。病毒的复制是在小肠和结肠绒毛上皮细胞浆中进行。由于病毒增殖首先造成细胞器的损伤，继而出现细胞功能障碍，造成肠绒毛损伤萎缩，造成了吸收表面积的减少，小肠黏膜碱性磷酸酶显著减少，引起营养物质吸收障碍，这是引起腹泻的主要原因。
严重腹泻引起的初生仔猪迅速脱水导致昏迷发烧，是病猪死亡的主要原因。
五、临床主要症状
潜伏期一般为一个星期左右，人工感染潜伏期为8～24小时。主要症状为水样腹泻，一般先呕吐。呕吐多发生于吃食或吃奶后。症状的轻重随年龄的大小而有差异，年龄越小，症状越重。一周龄内新生仔猪发生腹泻后3～4天会因严重脱水而死亡，不控制的话死亡率可达50%以上，刚出生腹泻的死亡率达100%。
六、防控方案
若PED在猪场全面爆发，各个阶段猪群均有腹泻发生，此时最重要的是保护产房仔猪的安全，返饲和加强产房仔猪的护理是重点。
1、怀孕母猪紧急处理措施
对于已经爆发的猪场，马上采集发病仔猪的胃肠道进行匀浆，匀浆好的样品在3天内返饲所有母猪，或者先对离预产期4周前的怀孕母猪进行返饲，在预产期4周内的怀孕母猪（无论发生腹泻与否），需要单独一栋干净的产房（没有发生过腹泻）待产。
自家组织灭活疫苗制备成功后，对所有母猪进行两次免疫，两次免疫结束后，1个月后产的母猪在产前进行两次自家组织灭活疫苗免疫，以后常年跟胎产前进行两次免疫。
2、产房仔猪紧急处理措施
在PED 爆发的早期，10日龄以上的仔猪，在尚未表现临床症状时可考虑全部断奶，在劳动力充足的情况下将其转移至保育舍进行人工护理。
如果10日龄以上的仔猪已经发生腹泻，可将其强制断奶，赶走母猪，以人用奶粉、兽用人工乳或水料来哺喂仔猪，再提供合适的环境，可加快小猪康复，成活率很高，但小猪康复后一般会出现生长缓慢的情况。仔猪一旦断奶，由PED导致的死亡率会直线下降。
10日龄以内的仔猪可考虑寄养或收集健康母猪的初乳进行人工喂乳，并且给予适当的抗生素以防止继发细菌感染，适当延长断奶日龄。也可尽量收集返饲后母猪的初乳，保存在-20℃，使用前用温水解冻，给出生仔猪给予5～10mL/头来预防仔猪腹泻，也可使用健康母猪进行代养。
3、提高产房温度，减少对猪群的各种应激
采取各种措施使产房整体温度保持在22℃以上，仔猪所处位置温度保持在25～27℃，同时保持产房适当通风，降低环境中病毒及氨气的浓度。发生腹泻时应暂停其他疫苗的免疫，暂停产房仔猪剪牙、断尾、阉割等常规操作，以免造成仔猪之间水平病毒传播。
4、保持产房干燥、干净，加强栏舍消毒
出现腹泻的栏舍，可选用对PEDV敏感的消毒药物用适当的浓度配合使用拖把给产床予以消毒，不要使用清水洗，栏舍上、保温板上等比较潮湿的地方可喷撒干粉消毒剂，尽量保持干燥。
做好场内的消毒和生物安全及限制猪群流动等综合措施。
5、给发病猪及时补液、控制继发感染
建议腹腔补液，注意补液的温度需与体温相近，补液的频率非常关键，争取4～5次/天，每次20～30毫升，做得好的猪群死亡率会下降到50%以下，同时适量添加抗生素以控制细菌性继发感染，如新霉素、林可霉素、磺胺类药物等，另外，7日龄以上仔猪让其自由饮水，水中应添加多种微量元素（如“硕维键”）和多维及酸化剂。
6、做好母猪的产前产后保健工作，预防产后三联症（MMA）
做好母猪产前产后的保健（如“利高-44”+“得米先”或“可牧喜”），防止母猪MMA的发生，防止由于仔猪缺乏或失去母乳中被动免疫抗体，而二次爆发病毒性腹泻。如果猪群中出现大量母乳免疫力不足的仔猪，PED就会变成地方流行性疾病，所以应当做好母猪产前产后的保健工作。
7、分娩舍全进全出，加强栏舍消毒并保证空栏时间
为了避免 PEDV的病毒循环，分娩舍务必采取全进全出的饲养模式，另外注意空栏后进行彻底清洗消毒，否则会反复发生并传播。同时注意均衡配种分娩，腹泻后仔猪死亡的母猪会提前发情，应空一个情期后配种，合理安排生产计划，保证产房空栏消毒时间及生产流程顺畅。
七、返饲的操作方法
返饲的材料有两种，一种是腹泻猪的粪便，另一种则是腹泻仔猪的肠道和内容物。
1、粪便返饲
要求收集刚刚腹泻的仔猪粪便，收集500毫升，分3、5、10毫升3个剂量，分别饲喂 150斤以上的肥猪各5头，选择肥猪都腹泻的剂量，喂产前4-5周的所有母猪。
2、仔猪肠道及内容物返饲
采集发病后17-18小时的仔猪小肠内容物，剪碎，用冰过的生理盐水1:3稀释加入打浆机打成匀浆，低温下绞碎，温度不超过4摄氏度，再将匀浆液用生理盐水1:5稀释后，在1小时内喂给产前4周以上的怀孕母猪，每头母猪20毫升，另外也可对健康仔猪进行人工攻毒使其发病，并采其肠道内容物进行返饲。同时需记录好返饲母猪的耳号、胎龄、返饲时间及返饲次数，仔细观察返饲后的临床症状。
3、返饲综合评估可参考如下标准
近6个月，种猪病毒性腹泻（含流行性腹泻和传染性胃肠炎）免疫在2次以下或者没有免疫，且种猪胎龄在3胎以内为主，应有70%以上的母猪出现腹泻；近6个月，种猪病毒性腹泻（含流行性腹泻和传染性胃肠炎）免疫在3次以上，且种猪胎龄在3胎以上为主，猪群整体的腹泻比例要在40%以上，群中后备猪、一胎猪的腹泻比例要在80%以上；对种猪胎次及免疫情况不详的群体，以后备猪和一胎猪出现80%以上腹泻为返饲有效的标志。
4、返饲的饲养管理
返饲2～3周内饲养管理需加强，如不串舍、工具专用、专人负责等。
八、样品的制备
1、返饲样品的制备
采集刚开始呕吐或刚开始腹泻的仔猪（已经拉稀退水死亡的或濒死的猪没有采样价值），整个胃肠道，采集好的胃肠道立即用绞肉机绞碎，同时按重量比1:1加入预冷的鲜牛奶，绞好的胃肠道立即给母猪返饲，返饲的量为1头仔猪的胃肠道返饲15～20头母猪。
2、组织种毒的制备
为了保存本场流行毒株的种毒，采集典型腹泻6小时内仔猪的胃肠道，先用绞肉机绞碎，绞碎的组织再用匀浆机匀浆（控制时间，防止匀浆机过热），匀浆的组织再用-80摄氏度反复冻融2次，冻融后的组织离心后取上清，分装成10ml一管，保存于-80摄氏度冰箱备用，保存时间一般不要超过1年。
九、自家组织灭活疫苗的制备
1、组织的采集刚开始呕吐或刚开始腹泻发病猪或返饲猪的（已经拉稀退水死亡的或濒死的猪没有采样价值）整个胃肠道并立即冰冻保存。
2、将胃肠道解冻后，去除较大的结缔组织和肠系膜淋巴结，并剪成小块置于绞肉机绞碎，绞碎后的样品置于组织匀浆机中。
3、加入1:1～1:2的生理盐水（不可少于1:1，否则匀浆不充分，组织块较大，且涡旋叶容易被结缔组织绑牢，损坏匀浆机）进行匀浆，按照转5s、停5s的方式进行匀浆，匀浆约60s，无肉眼可见的较大组织块为止。
4、将匀浆好的组织进行冻融3次。急冻和速溶有助于组织细胞内病毒的释放。
5、有条件的情况下对冻融后的样品进行离心，2500rpm离心20～30min，如果上层仍旧有漂浮结缔组织或脂肪组织时，可用4层纱布进行过滤，若无离心条件，用120目的4层纱布进行过滤。
6、病毒含量的测定用荧光定量PCR检测样品中的病毒核酸，根据标准曲线计算每毫升样品中PEDV的含量，最好每毫升的核酸拷贝数不低于1010。
7、组织液进行灭活按照6mL甲醛溶液/升组织液的用量进行添加，在摇床上37℃（样品温度），灭活36～40h。
8、将灭活后的组织液，无菌加入与甲醛等量的10%硫代硫酸钠（10g硫代硫酸钠加入100mL PBS过滤除菌），中和甲醛后加入100mg/L的庆大霉素，待用。
9、将灭活并中和后的组织液，按照1:1比例加入灭菌的ISA206佐剂，进行乳化（磁力搅拌器低温搅拌2小时），乳化后进行分装。
10、最后，盖上塞子并压盖。
十、制定猪场PED驯化控制操作标准流程
待猪场控制好腹泻后，制定猪场PED防控标准流程，重点考虑以下几个方面：
1、后备隔离驯化
两次返饲加疫苗免疫。
2、生产猪群免疫程序
建议使用含有变异毒株的灭活苗和细菌性疫苗进行免疫。
3、监控猪场PEDV活跃程度
可选择在断奶前后、保育转群前后、母猪妊娠中期等几个阶段使用快速检测试剂盒来监控猪场PEDV流行状况，以便改进PED控制措施并提前采取干预措施。
4、PEDV防控的重点是后备母猪的驯化
后备母猪在配种前饲喂本场的病料（发病保存或人工返饲仔猪的病料），返饲方法同上，返饲应在隔离的猪场进行，返饲后猪拉稀的比例最好大于30%。返饲后检测到母猪排毒情况，后备母猪不再排毒后才能进入生产群，排毒隔离期一般不低于30天。
